Com o método DropDownList.Items.Add, pode ser adicionado um ListItem como no exemplo abaixo, esse item será adicionado abaixo do ultimo item do DropDownList
DropDownList1.Items.Add(new ListItem("Selecionar", "0"));
No método DropDownList.Items.Insert, podemos definir o index, ou seja, podemos inserir nosso ListItem na posição que desejamos, veja um exemplo:
DropDownList1.Items.Insert(1, new ListItem("item 1", "1"));